Pod lupou můžete zkoumat části rostlin přímo, bez jakéhokoli zpracování.Abyste něco zkoumali pod mikroskopem, musíte si připravit mikropreparát. Předmět je umístěn na podložní sklíčko. Pro lepší viditelnost a konzervaci se vloží do kapky vody a nahoře se přikryje velmi tenkým krycím sklem. Taková droga se nazývá dočasná, po práci ji lze omýt ze skla. Ale můžete vyrobit trvalou drogu, která vydrží mnoho let. Poté je předmět uzavřen nikoli ve vodě, ale ve speciální průhledné pryskyřičné hmotě, která rychle tvrdne a pevně přilepí sklíčko a krycí sklíčko. Existuje celá řada barviv, kterými se přípravky barví. Takto se získávají stálé barevné přípravky.
Co děláme. Připravte mikroskop k práci, upravte světlo. Otřete sklíčko a krycí sklíčko papírovou utěrkou. Napipetujte kapku slabého roztoku jódu na podložní sklíčko (1).
Co dělat. Vezměte cibuli. Rozřízněte ji podélně a odstraňte vnější šupiny. S masitou šupinou odtrhněte kus povrchového filmu pinzetou s jehlou. Vložte jej do kapky vody na podložní sklíčko (2).
Jemně rozetřete kůži pitevní jehlou (3).
Co dělat. Zakryjte krycím sklíčkem (4).
Je připravena dočasná mikropreparace slupky cibule (5).
Co děláme. Začněte zkoumat připravený mikropreparát při 56násobném zvětšení (x8 objektiv, x7 okulár). Opatrným pohybem podložního sklíčka po jevišti najděte místo na preparátu, kde jsou buňky nejlépe vidět.Co pozorujeme. Na mikropreparaci jsou viditelné podlouhlé buňky, které k sobě těsně přiléhají (6).
Co děláme. Buňky můžete zkoumat na mikroskopu při 300násobném zvětšení (objektiv x20, okulár x15).
Co pozorujeme. Při velkém zvětšení (7) lze vidět hustou průhlednou skořápku s tenčími oblastmi - póry. Uvnitř buňky je bezbarvá viskózní látka – cytoplazma (obarvená jódem).
V cytoplazmě je malé husté jádro, ve kterém se nachází jadérko. Téměř ve všech buňkách, zejména ve starých, jsou jasně viditelné dutiny - vakuoly.
Závěr:Živý rostlinný organismus se skládá z buněk. Obsah buňky představuje polotekutá průhledná cytoplazma, ve které je hustší jádro s jadérkem. Buněčná membrána je průhledná, hustá, elastická, neumožňuje šíření cytoplazmy, dává jí určitý tvar. Některé části skořápky jsou tenčí – jedná se o póry, kterými dochází ke komunikaci mezi buňkami.Buňka je tedy strukturní jednotkou rostliny.
Stanislav Yablokov z Jaroslavské státní univerzity. P. G. Děmidová
Už dva roky pozoruji mikrosvět doma a rok ho natáčím kamerou. Během této doby jsem na vlastní oči viděl, jak vypadají krvinky, šupiny padající z křídel motýlů, jak bije srdce šneka. Z učebnic, videopřednášek a tematických stránek se samozřejmě dalo mnohé naučit. Ale zároveň by tam nebyl žádný pocit přítomnosti, blízkosti toho, co není vidět pouhým okem. Že to nejsou jen slova z knihy, ale osobní zkušenost. Zážitek, který je dnes dostupný každému.
Cibulová slupka. Zvětšení 1000×. Barveno jódem. Fotografie ukazuje buněčné jádro.
Cibulová slupka. Zvětšení 1000×. Mořeno azurovým eosinem. Na fotografii je v jádře vidět jadérko.
Brambor. Modré skvrny jsou zrnka škrobu. Zvětšení 100×. Barveno jódem.
Film na hřbetu švába. Zvětšení 400×.
Švestková kůra. Zvětšení 1000×.
Bibionidní broučí křídlo. Zvětšení 400×.
Křídlo motýla hlohu. Zvětšení 100×.
Šupiny z křídel můry. Zvětšení 400×.
Chloroplasty v buňkách trávy. Zvětšení 1000×.
Dítě šnek. Zvětšení 40×.
Jetelový list. Zvětšení 100×. Některé buňky obsahují tmavě červený pigment.
Jahodový list. Zvětšení 40×.
Chloroplasty v buňkách řas. Zvětšení 1000×.
Krevní nátěr. Mořeno azuro-eozinem podle Romanovského. Zvětšení 1000×. Na fotografii: eozinofil na pozadí erytrocytů.
Krevní nátěr. Mořeno azuro-eozinem podle Romanovského. Zvětšení 1000×. Na fotografii: vlevo - monocyt, vpravo - lymfocyt.
Co koupit
Divadlo začíná věšákem a mikrofotografie nákupem vybavení a především mikroskopu. Jednou z jeho hlavních charakteristik je množina dostupných zvětšení, která jsou určena součinem zvětšení okuláru a objektivu.
Ne každý biologický vzorek je vhodný pro prohlížení při velkém zvětšení. Je to dáno tím, že čím větší zvětšení optické soustavy, tím menší hloubka ostrosti. V důsledku toho bude obraz nerovných povrchů léku částečně rozmazaný. Proto je důležité mít sadu objektivů a okulárů, která vám umožní pozorovat se zvětšením od 10-20 do 900-1000×. Někdy je oprávněné dosáhnout zvětšení 1500x (15x okulár a 100x objektiv). Větší zvětšení nemá smysl, protože vlnová povaha světla neumožňuje vidět jemnější detaily.
Dalším důležitým bodem je typ okuláru. Kolika očima chcete vidět obrázek? Obvykle se rozlišují monokulární, binokulární a trinokulární odrůdy. V případě monokuláru budete muset mžourat a při delším pozorování unavovat oko. Podívejte se do dalekohledu oběma očima (nemělo by se zaměňovat se stereomikroskopem, který poskytuje trojrozměrný obraz). Pro natáčení fotografií a videa mikroobjektů budete potřebovat „třetí oko“ - trysku pro instalaci zařízení. Mnoho výrobců vyrábí speciální kamery pro své modely mikroskopů, ale můžete použít i běžný fotoaparát, když si k němu dokoupíte adaptér.
Pozorování při velkém zvětšení vyžaduje dobré osvětlení kvůli malé apertuře objektivů. Světelný paprsek z iluminátoru, převedený do optického zařízení - kondenzoru, osvětluje preparát. Podle charakteru osvětlení existuje více metod pozorování, z nichž nejčastější jsou metody světlých a tmavých polí. V prvním, nejjednodušším, mnohým známým ze školy, je preparát zespodu rovnoměrně osvětlen. V tomto případě se přes opticky průhledné části preparátu šíří světlo do čočky a v neprůhledných částech je absorbováno a rozptylováno. Na bílém pozadí se získá tmavý obraz, odtud název metody. S temným kondenzátorem je všechno jinak. Světelný paprsek vycházející z něj má tvar kužele, paprsky nedopadají do čočky, ale jsou rozptýleny na neprůhledném preparátu, a to i ve směru čočky. Výsledkem je, že na tmavém pozadí je vidět světlý objekt. Tato metoda pozorování je vhodná pro studium průhledných objektů s nízkým kontrastem. Pokud tedy plánujete rozšířit škálu pozorovacích metod, měli byste si vybrat modely mikroskopů, které umožňují instalaci dalšího vybavení: kondenzátor tmavého pole, clona pro tmavé pole, zařízení pro fázový kontrast, polarizátory atd.
Optické systémy nejsou ideální: průchod světla jimi je spojen s deformacemi obrazu – aberacemi. Snaží se proto vyrobit čočky a okuláry tak, aby tyto aberace byly co nejvíce eliminovány. To vše ovlivňuje jejich konečnou cenu. Z důvodu ceny a kvality má smysl kupovat planární achromatické čočky pro profesionální výzkum. Silné objektivy (například se zvětšením 100x) mají numerickou aperturu větší než 1 při použití imerze, vysoce refrakčního oleje, glycerinového roztoku (pro UV oblast) nebo pouze vody. Pokud tedy kromě „suchých“ čoček berete i čočky imerzní, měli byste se o imerzní kapalinu předem postarat. Její index lomu musí nutně odpovídat konkrétní čočce.
Někdy byste měli věnovat pozornost designu jeviště a rukojetí pro jeho ovládání. Vyplatí se vybrat typ osvětlovače, kterým může být buď obyčejná žárovka, nebo LED, která je jasnější a méně se zahřívá. Mikroskopy mají také individuální vlastnosti. Každá další možnost je navýšením ceny, takže výběr modelu a konfigurace je na spotřebiteli.
Dnes často kupují levné mikroskopy pro děti, monokuláry s malou sadou objektivů a skromnými parametry. Mohou sloužit jako dobrý výchozí bod nejen pro studium mikrokosmu, ale také pro seznámení se základními principy mikroskopu. Poté by dítě již mělo koupit serióznější zařízení.
Jak se dívat
Můžete si koupit daleko od levných sad hotových léků, ale pak pocit osobní účasti na studii nebude tak jasný a dříve nebo později se omrzí. Proto je třeba dbát jak na objekty pro pozorování, tak na dostupné prostředky pro přípravu preparátů.
Pozorování v procházejícím světle předpokládá, že studovaný objekt je dostatečně tenký. Dokonce i slupka bobulí nebo ovoce je příliš silná, takže řezy jsou zkoumány pod mikroskopem. Doma se vyrábějí obyčejnými žiletky. Aby nedošlo k rozdrcení kůry, je umístěna mezi kousky korku nebo naplněna parafínem. S určitou dovedností můžete dosáhnout tloušťky řezu několika vrstev buněk a v ideálním případě byste měli pracovat s jednobuněčnou vrstvou tkáně - několik vrstev buněk vytváří neostrý, chaotický obraz.
Testovaný přípravek se umístí na podložní sklíčko a v případě potřeby se přikryje krycím sklíčkem. Brýle si můžete koupit v obchodě se zdravotnickými potřebami. Pokud přípravek na sklo dobře nepřilne, zafixuje se mírným navlhčením vodou, imerzním olejem nebo glycerinem. Ne každý lék okamžitě otevře svou strukturu, někdy potřebuje „pomoc“ tónováním svých tvarových prvků: jádra, cytoplazmy, organely. Dobrými barvivy jsou jód a zeleň. Jód je dosti všestranné barvivo, dokáže obarvit širokou škálu biologických přípravků.
Při výjezdu do přírody byste se měli zásobit sklenicemi na zachytávání vody z nejbližší nádrže a sáčky na listí, zaschlé zbytky hmyzu apod.
Na co se dívat
Mikroskop je zakoupen, nástroje jsou zakoupeny - je čas začít. A začít byste měli tím nejdostupnějším – například cibulovou slupkou. Tenká sama o sobě, zbarvená jódem, odhaluje ve své struktuře jasně odlišitelná buněčná jádra. Tato zkušenost, známá ze školy, by měla být provedena jako první. Cibulová kůra by měla být nalita jódem po dobu 10-15 minut, poté opláchnuta pod tekoucí vodou.
Kromě toho lze jód použít k barvení brambor. Řez musí být proveden co nejtenčí. Doslova 5-10 minut jeho pobytu v jódu ukáže vrstvy škrobu, které zmodrají.
Na balkonech se často hromadí velké množství mrtvol létajícího hmyzu. Nespěchejte, abyste se jich zbavili: mohou sloužit jako cenný materiál pro výzkum. Jak můžete vidět z fotografií, zjistíte, že hmyz má na křídlech chlupy, které ho chrání před navlhnutím. Vysoké povrchové napětí vody nedovolí, aby kapka "propadla" chloupky a dotkla se křídla.
Pokud jste se někdy dotkli křídla motýla nebo můry, pravděpodobně jste si všimli, že z něj odlétá jakýsi „prach“. Obrázky jasně ukazují, že se nejedná o prach, ale o šupiny z křídel. Mají různé tvary a dají se celkem snadno odtrhnout.
Kromě toho můžete pomocí mikroskopu studovat strukturu končetin hmyzu a pavouků, zvažte například chitinózní filmy na zádech švábů. A při správném zvětšení se ujistěte, že takové filmy se skládají z těsně přiléhajících (případně srostlých) šupin.
Neméně zajímavým objektem k pozorování je slupka bobulí a ovoce. Jeho buněčná struktura však může být buď nerozeznatelná, nebo jeho tloušťka neumožní jasný obraz. Tak či onak, než bude získána dobrá příprava, bude třeba udělat mnoho pokusů: protřídit různé odrůdy hroznů, abychom našli takovou, ve které by barvicí látky slupky měly zajímavý tvar, nebo udělat několik řezů slupky. švestka, dosažení jednobuněčné vrstvy. V každém případě bude odměna za vykonanou práci hodná.
Tráva, řasy, listí jsou pro výzkum ještě dostupnější. Ale navzdory všudypřítomnosti může být výběr a příprava dobré drogy z nich obtížné. Nejzajímavější na zeleni jsou snad chloroplasty. Proto musí být řez extrémně tenký.
Přijatelná tloušťka se často vyskytuje u zelených řas nacházejících se v jakýchkoli otevřených vodních útvarech. Najdete tu i plovoucí řasy a mikroskopické vodní obyvatele – plůdky, dafnie, améby, kyklopy a střevíce. Malé šnečí miminko, opticky průhledné, vám umožní vidět tlukot vlastního srdce.
sebeprůzkumník
Po prostudování jednoduchých a cenově dostupných přípravků budete chtít zkomplikovat techniku pozorování a rozšířit třídu studovaných objektů. To bude vyžadovat jak speciální literaturu, tak specializované nástroje, které jsou pro každý typ objektu jiné, ale přesto mají určitou univerzálnost. Například metoda Gramova barvení, kdy se různé druhy bakterií začnou lišit barvou, lze aplikovat na jiné, nebakteriální buňky. Blízko mu je metoda barvení krevních nátěrů podle Romanovského. V prodeji je jak hotové tekuté barvivo, tak prášek skládající se z jeho složek - azuru a eosinu. Lze je zakoupit ve specializovaných prodejnách nebo objednat online. Pokud barvivo neseženete, můžete požádat laborantku, která vám na klinice provádí krevní testy, o sklenici se skvrnou.
V pokračování tématu výzkumu krve je třeba zmínit Gorjajevovu kameru - zařízení pro počítání počtu krvinek a posuzování jejich velikosti. Metody vyšetření krve a jiných tekutin pomocí Gorjaevovy kamery jsou popsány ve speciální literatuře.
V moderním světě, kde jsou různé technické prostředky a zařízení v docházkové vzdálenosti, se každý rozhoduje sám, za co utratí peníze. Může to být drahý notebook nebo televize s přemrštěnou velikostí úhlopříčky. Jsou i tací, kteří odtrhnou oči od obrazovek a nasměrují to daleko do vesmíru, pořídí si dalekohled. Mikroskopie se může stát zajímavým koníčkem a pro někoho i uměním, prostředkem sebevyjádření. Při pohledu do okuláru mikroskopu pronikáme hluboko do přírody, jejíž součástí jsme i my sami.
"Věda a život" o mikrofotografii:
Mikroskop "Analit" - 1987, č. 1.
Oshanin S. L. S mikroskopem u rybníka. - 1988, č. 8.
Oshanin S. L. Život světu neviditelný. - 1989, č. 6.
Miloslavský V. Ju. - 1998, č. 1.
Mologina N. - 2007, č. 4.
Glosář k článku
Clona- efektivní otevření optické soustavy, určené rozměry zrcadel, čoček, clon a dalších částí. Úhel α mezi krajními paprsky kuželového světelného paprsku se nazývá úhlová apertura. Číselná apertura A = n sin(α/2), kde n je index lomu prostředí, ve kterém se nachází objekt pozorování. Rozlišení přístroje je úměrné A, osvětlení obrazu je A 2 . Pro zvětšení clony se používá ponor.
Ponoření- průhledná kapalina s indexem lomu n > 1. Preparát a objektiv mikroskopu jsou do ní ponořeny, čímž se zvětší jeho apertura a tím se zvýší rozlišovací schopnost.
plan achromatický objektiv- Čočka s korekcí chromatické aberace, která vytváří plochý obraz v celém poli. Obyčejné achromáty a apochromáty (aberace korigované pro dvě a tři barvy, v tomto pořadí) poskytují křivočaré pole, které nelze korigovat.
Fázový kontrast- metoda mikroskopického výzkumu založená na změně fáze světelné vlny, která prošla průhledným preparátem. Fáze kmitání není pouhým okem viditelná, proto speciální optika – kondenzor a čočka – mění fázový rozdíl na negativní nebo pozitivní obraz.
Monocyty- jedna z forem bílých krvinek.
Chloroplasty- zelené organely rostlinných buněk odpovědné za fotosyntézu.
Eosinofily- krvinky, které hrají ochrannou roli při alergických reakcích.
Při výrobě dočasných mikropreparátů je třeba dodržet následující sled operací:
- 1. Důkladně omyjte a osušte sklíčko a krycí sklíčko. Abyste neporušili velmi křehké krycí sklíčko, musíte ho vložit do záhybu ubrousku mezi palec a ukazováček pravé ruky a krouživými pohyby prsty jemně otřít.
- 2. Pipetou naneste kapku tekutiny (voda, glycerin, roztok, činidlo nebo barvivo) na podložní sklíčko.
- 3. Proveďte řez studovaného orgánu čepelí. Čepel musí být velmi ostrá.
- 4. Vyberte nejtenčí část, přeneste ji pitevní jehlou nebo tenkým štětečkem do středu podložního sklíčka do kapky tekutiny.
- 5. Sekci uzavřete krycím sklíčkem, aby se pod ni nedostal vzduch. Chcete-li to provést, uchopte krycí sklíčko dvěma prsty za okraje a přisuňte spodní okraj pod úhlem k okraji kapky kapaliny a jemně je spusťte.
- 6. Pokud je tekutiny hodně a vytéká zpod krycího sklíčka, odstraňte je filtračním papírem. Pokud jsou však pod krycím sklíčkem místa zaplněná vzduchem, přidejte tekutinu tak, že ji kápnete blízko okraje krycího sklíčka a na opačnou stranu filtrační papír.
Učitelé biologie a vedoucí kroužků dříve nebo později stojí před úkolem udělat vzdělávací mikropřípravu. Jaký druh látky je schopen fixovat biologický objekt na dlouhou dobu a jak tento postup učinit jednoduchým a cenově dostupným. Známé balzámy (pryskyřice-fixátory) nikdy nebyly snadno dostupnými látkami, zvláště ve vzdálenosti od velkých měst. Navíc říkají, že tyto látky nejsou neškodné. A konečně, proces jejich použití je poměrně obtížný.
Pro výrobu léku můžete použít lepidlo PVA. Důležité je, aby droga byla vlhká, dobře navlhčená a lepidlo čerstvé a mírně zředěné čistou studenou převařenou vodou na požadovanou koncentraci (lepidlo je emulze a snadno se ředí). Po několika pokusech a omylech lze požadovanou koncentraci bez problémů sestavit a určit.
Poté se na čisté podložní sklíčko nanese kapka vařené nebo destilované vody. Vodu je nutné opatrně odstranit čistým hadříkem nepouštějícím vlákna nebo filtračním papírem, aby bylo sklo mírně vlhké. To, stejně jako obsah vlhkosti ve vzorku, podporuje rovnoměrné smáčení (bez bublin). Na připravený povrch je třeba nanést malou kapku předem připraveného lepidla PVA, aby se neobjevily vzduchové bubliny. Někdy neruší, ale vzhled drogy je zkažený. Do této kapky se opatrně přenese předem připravený řez nebo vzorek, například dafnie, která byla předtím usmrcena horkou vodou. Poté plynulým šikmým pohybem přiložte navrch krycí sklíčko, rovněž čisté a mírně vlhké. Vrstva lepidla mezi skly by měla být co nejtenčí.
Pokud se něco nepovedlo, a vzorek je hodnotný a dostatečně velký, téměř vždy, na rozdíl od pryskyřic, je možné jej omýt obyčejnou vodou a postup opakovat. Přebytečné lepidlo se jemně smyje tenkým proudem vody; musíte se ujistit, že neteče mezi tabulemi. Krycí sklo je nutné držet. Mírně zakalené zbytky vody lze opatrně odstranit filtračním papírem nebo tenkým hadříkem, který nepouští vlákna. metoda biologické mikropreparace
Hotové přípravky by měly být umístěny na teplém a suchém místě. Ukazatelem připravenosti léku je jeho průhlednost. V závislosti na mnoha faktorech trvá sušení do průhledného stavu jeden až čtyři týdny. Stává se, že příliš silná vrstva lepidla nebo lepidlo znečištěné nečistotami zcela nezprůhlední - to poněkud zhoršuje obraz, ale vzhledem k malé hloubce ostrosti mikroskopu jsou i takové přípravky ke studiu dostupné.
Neexistuje žádná záruka, že tuto metodu lze použít k výrobě jakýchkoli přípravků, protože některé z nich vyžadují barvení a barviva mohou interagovat s lepidlem.
T.N. Lashkina, učitelka biologie a ekologie na střední škole č. 23 z města Syzran, nabízí následující způsob přípravy mikropreparátů. Můžete si vzít běžnou želatinu, nalít ji vodou, aby bobtnala. Poté do polévkové lžíce nasbírejte trochu nabobtnalé želatiny (bez vody) a zahřejte na ohni. Když se želatina rozpustí (není nutné, aby se vařil), kápněte ji na podložní sklíčko. Do této kapky vložte vzorek a uzavřete krycím sklíčkem, dobře jej přitlačte prstem, aby se želatina rovnoměrně rozprostřela. Mikropreparát je připraven.
Pokud nejsou krycí sklíčka k dispozici, lze místo krycího sklíčka použít celofán. Celofán má navíc jednu výhodu: mikropreparát nelze drtit, protože. Celofán je elastický a nepraská jako krycí sklíčko.
S želatinou se musí pracovat rychle, jinak zmrzne. Pokud se to však stane, stačí sklenici podržet nad ohněm - a želatina se opět stane tekutou. Želatina je nezávadná, cenově dostupná a velmi ekonomická.
Prvním krokem na cestě ke studiu mikrokosmu je samozřejmě výběr a nákup samotného mikroskopu. A pokud jste měli to štěstí, že jste se s tímto nelehkým úkolem vypořádali, vybrali jste si, který mikroskop si koupíte, a možná jste si ho již koupili, pak můžeme říci, že jste již téměř v polovině svého cíle. A teď už jste mikroskop vyndali z krabice, sestavili, nainstalovali, nastavili ... a co dál? A pak musíte udělat hodně práce, protože k tomu, abyste se přiblížili světu vědy, se ukazuje, že nestačí jen , ale stejně je potřeba se naučit připravovat preparáty na vyšetření pod mikroskopem.
Mnoho výrobců optických přístrojů vyrábí dětské mikroskopy s hotovými přípravky v sadě. I dnes si můžete zakoupit různé sady hotových preparátů, tzv. diapozitivy, 10, 25, 50 a dokonce 100 kusů skleněných kusů různých předmětů. A přestože jsou takové soupravy poměrně drahým potěšením, mohou být velmi zajímavé a užitečné jak pro dítě, tak pro studenta lékařského ústavu, protože mnoho přípravků je prostě nereálné připravit si doma.
Mezi hotovými preparáty tak můžete najít vzorky bakterií, řezy plic, jater, kůže lidí i zvířat a další zajímavé vzorky, se kterými se v běžném životě jen tak snadno, ne-li nelze setkat.
Ale kromě takových hotových příprav můžete také prozkoumávat různé předměty dostupné doma. K přípravě předmětů pro vyšetření pod mikroskopem budete potřebovat podložní sklíčko a krycí sklíčko, které lze zakoupit v obchodech s optickými potřebami.
Jedním z nejoblíbenějších vzorků, které si můžete sami uvařit, je cibulový film. Chcete-li to provést, musíte nejprve oloupat cibuli ze suchých slupek a poté opatrně (můžete použít pinzetu), abyste odstranili tenký film. Na podložní sklíčko dejte několik kapek vody a opatrně na ně položte cibulový film. Pokud je fólie trochu zmačkaná, vezměte jehlu a narovnejte s ní vzorek na skle. Poté pomocí pipety kápněte kapku roztoku jódu a přikryjte vzorek krycím sklíčkem.
Podobně lze připravit spoustu různých vzorků z rostlin, zeleniny atd. Je třeba pamatovat na to, že při zkoumání předmětu pod biologickým mikroskopem je nutné brát ploché průhledné předměty. Biologické mikroskopy jsou určeny pro zkoumání v procházejícím světle a mají nižší osvětlení, takže řezy rostlin by měly být co nejtenčí a nejpřesnější. Pro tento účel byl vynalezen nástroj, jako je mikrotom. Mikrotom je nástroj, pomocí kterého lze snadno připravit velmi tenké řezy biologických tkání. Tolik dětských mikroskopů se dodává s mikrotomy, samozřejmě ne profesionálními, ale bezpečnějšími pro vaše miminko. Ale i když mezi pitevními doplňky nemáte mikrotom, můžete použít běžnou čepel nebo nůž. Nezapomínejte na preventivní opatření a bezpečnost svého dítěte, proto je lepší nenechat dítěti vzít čepel, nůž nebo mikrotom bez vašeho dozoru.
Při přípravě různých vzorků můžete potřebovat také barviva, pro která můžete použít roztok jódu, vodný roztok methylenové modři (jinými slovy „modrá“), eosin atd.
Pod mikroskopem můžete zkoumat i krystalky cukru, soli, vlasového kořínku, plísně (např. pěstovat čajovou plíseň v konvici).
Pokud se vám připravený vzorek příliš nelíbí, můžete velmi opatrně zkusit oddělit krycí sklíčko a podložní sklíčko (takové přípravky, které dlouho nefixují, se nazývají dočasné), opláchnout je, otřít, osušit a použít později k přípravě dalších přípravky. Buďte obzvláště opatrní, protože krycí sklíčka a sklíčka jsou velmi tenká a křehká, snadno praskají a nedovolte dětem, aby si se sklíčky hrály. Chcete-li si tento preparát uložit, pak před jeho zakrytím krycím sklíčkem kápněte okraje preparátu trochou fixačního prostředku (např. jedlové pryskyřice nebo průhledného lepidla) (takový preparát se bude nazývat permanentní). Poté přitlačte a nechte zaschnout (asi den).
Nyní, po úspěšném dokončení tohoto kroku, můžete zahájit samotný proces pozorování a výzkumu! Přejeme vám úspěch!
Gramova skvrna.
Fáze 1- příprava nátěru.
Podložní sklíčko je vypáleno v plameni plynového hořáku. Voskovou tužkou označte hranice budoucího stěru ve formě kruhu o průměru 1-2 cm a položte sklenici na stůl. Pomocí kalcinované smyčky se do středu kruhu aplikuje malá kapka sterilního izotonického roztoku chloridu sodného (ICN). Potom se k této kapce přidá malé množství bakteriální kultury, opatrně emulguje a rozprostře v tenké vrstvě v kruhu. Nátěry z bujónových kultur se připravují bez předchozí aplikace ICN.
2 etapa- sušení.
Sklo je ponecháno na vzduchu, dokud vlhkost nezmizí.
3 etapa- fixace.
Fixace se provádí za účelem zabití mikrobů, jejich přichycení ke sklu a zvýšení jejich náchylnosti k barvivům. Pro fixaci se na plamen hořáku třikrát přiloží podložní sklíčko (tah nahoru) na 2-3 sekundy s intervalem 4-6 sekund. Nátěry z hnisu, krve, sputa, edematózní tekutiny se fixují ponořením do fixačních tekutin (aceton, Nikiforovova směs). Tato fixace zabraňuje hrubým deformacím studovaného předmětu.
Fáze 4 - barvení.
Existují jednoduché a složité (rozlišovací) metody barvení. Jednoduché metody umožňují posoudit velikost, tvar, lokalizaci a relativní polohu buněk. Komplexní metody umožňují zjistit strukturu mikrobů a často jejich nerovný vztah k barvivům. Příkladem jednoduchých metod je barvení fuchsinem (1-2 minuty), methylenovou modří nebo krystalovou violetí (3-5 minut) a komplexními - barvení podle Grama, Romanovsky-Giemsa, Ziehl-Nielsen.
Gramova diferenciační metoda
Po obarvení touto metodou se některé bakterie obarví do tmavě fialové barvy (grampozitivní, Gr +). ostatní - ve vínově červené (gram-negativní, Gr-). Podstatou tohoto způsobu barvení je, že bakterie Gr+ pevně fixují komplex genciánové violeti a jódu bez odbarvování etanolem. Gr-bakterie se po vybělení dobarví fuchsinem.
Kroky Gramova barvení