Sub o lupă, puteți examina părți de plante direct, fără nicio prelucrare.Pentru a examina ceva la microscop, trebuie să pregătiți un micropreparat. Obiectul este plasat pe o lamă de sticlă. Pentru o mai bună vizibilitate și conservare, se pune într-o picătură de apă și se acoperă deasupra cu un capac de sticlă foarte subțire. Un astfel de medicament se numește temporar, după muncă poate fi spălat de pe sticlă. Dar puteți face un medicament permanent care va dura mulți ani. Apoi obiectul este închis nu în apă, ci într-o substanță rășinoasă transparentă specială, care se întărește rapid, lipând ferm lama și lama de acoperire. Există o varietate de coloranți cu care să colorați preparatele. Așa se obțin preparatele colorate permanente.
Ce facem. Pregătiți microscopul pentru lucru, reglați lumina. Ștergeți lama și lama cu un prosop de hârtie. Se pipetează o picătură dintr-o soluție slabă de iod pe o lamă de sticlă (1).
Ce să fac. Luați o ceapă. Tăiați-o pe lungime și îndepărtați solzii exterioare. Cu o cântare cărnoasă, rupeți o bucată din pelicula de suprafață cu o pensetă cu un ac. Puneți-l într-o picătură de apă pe o lamă de sticlă (2).
Întindeți ușor pielea cu acul de disecție (3).
Ce să fac. Acoperiți cu lamelă (4).
Microprepararea temporară a pielii de ceapă este gata (5).
Ce facem.Începeți să examinați micropreparatul preparat la o mărire de 56 de ori (obiectiv x8, ocular x7). Deplasând cu grijă lama de sticlă peste scenă, găsiți un loc pe preparat unde celulele se văd cel mai bine.Ceea ce observăm. Pe micropreparat, celulele alungite sunt vizibile, aderând strâns una de alta (6).
Ce facem. Puteți examina celulele la microscop la o mărire de 300 de ori (obiectiv x20, ocular x15).
Ceea ce observăm. La mărire mare (7), se poate vedea o coajă densă, transparentă, cu zone mai subțiri - pori. În interiorul celulei se află o substanță vâscoasă incoloră - citoplasma (colorată cu iod).
În citoplasmă este un mic nucleu dens, în care se află nucleolul. În aproape toate celulele, în special în cele vechi, cavitățile - vacuolele - sunt clar vizibile.
Concluzie: Un organism vegetal viu este format din celule. Conținutul celulei este reprezentat de o citoplasmă semi-lichidă transparentă, în care există un nucleu mai dens cu un nucleol. Membrana celulară este transparentă, densă, elastică, nu permite citoplasmei să se răspândească, îi conferă o anumită formă. Unele secțiuni ale cochiliei sunt mai subțiri - aceștia sunt pori, prin care are loc comunicarea între celule.Astfel, o celulă este o unitate structurală a unei plante.
Stanislav Yablokov, Universitatea de Stat din Iaroslavl. P. G. Demidova
De doi ani încoace observ microlumea acasă, iar de un an o filmez cu o cameră. În acest timp, am văzut cu ochii mei cum arată celulele sanguine, solzi căzând din aripile fluturilor, cum bate inima unui melc. Desigur, se pot învăța multe din manuale, prelegeri video și site-uri tematice. Dar, în același timp, nu ar exista senzația de prezență, de apropiere de ceea ce nu este vizibil cu ochiul liber. Că acestea nu sunt doar cuvinte dintr-o carte, ci experiență personală. O experiență care este disponibilă pentru toată lumea astăzi.
Coaja de ceapa. Mărire 1000×. Patat cu iod. Fotografia arată nucleul celulei.
Coaja de ceapa. Mărire 1000×. Patat cu azur-eozina. În fotografie, un nucleol este vizibil în nucleu.
Cartof. Petele albastre sunt boabe de amidon. Mărire 100×. Patat cu iod.
Film pe spatele unui gandac. Mărire 400×.
Coaja de prune. Mărire 1000×.
Aripă de insecte Bibionide. Mărire 400×.
Aripa unui fluture de păducel. Mărire 100×.
Solzi din aripile unei molii. Mărire 400×.
Cloroplastele din celulele ierbii. Mărire 1000×.
Puie de melc. Mărire 40×.
Frunza de trifoi. Mărire 100×. Unele celule conțin un pigment roșu închis.
Frunza de capsuni. Mărire 40×.
Cloroplastele din celulele algelor. Mărire 1000×.
Frotiu de sânge. Colorat cu azur-eozină conform Romanovsky. Mărire 1000×. În fotografie: eozinofile pe fundalul eritrocitelor.
Frotiu de sânge. Colorat cu azur-eozină conform Romanovsky. Mărire 1000×. În fotografie: în stânga - un monocit, în dreapta - un limfocit.
Ce sa cumpar
Teatrul începe cu un cuier, iar microfotografie cu achiziționarea de echipamente și, mai ales, un microscop. Una dintre principalele sale caracteristici este setul de măriri disponibile, care sunt determinate de produsul dintre măririle ocularului și obiectivului.
Nu orice specimen biologic este bun pentru vizualizare la mărire mare. Acest lucru se datorează faptului că cu cât mărirea sistemului optic este mai mare, cu atât adâncimea câmpului este mai mică. În consecință, imaginea suprafețelor neuniforme ale medicamentului va fi parțial neclară. Prin urmare, este important să aveți un set de obiective și oculare care să vă permită să observați cu o mărire de la 10-20 la 900-1000×. Uneori se justifică obținerea unei măriri de 1500x (ocular 15x și obiectiv de 100x). O mărire mai mare nu are sens, deoarece natura ondulată a luminii nu vă permite să vedeți detalii mai fine.
Următorul punct important este tipul de ocular. Cu câți ochi vrei să vezi imaginea? De obicei, se disting soiurile monoculare, binoculare și trinoculare. In cazul unui monocular, va trebui sa strabi, obosind ochiul in timpul observarii prelungite. Privește în binoclu cu ambii ochi (nu trebuie confundat cu un microscop stereo, care oferă o imagine tridimensională). Pentru filmarea foto și video a micro-obiectelor, veți avea nevoie de un „al treilea ochi” - o duză pentru instalarea echipamentelor. Mulți producători produc camere speciale pentru modelele lor de microscop, dar puteți folosi și o cameră obișnuită, cumpărând un adaptor pentru aceasta.
Observarea la măriri mari necesită o iluminare bună datorită deschiderii mici a obiectivelor. Fasciculul de lumină de la iluminator, transformat într-un dispozitiv optic - un condensator, luminează preparatul. În funcție de natura iluminării, există mai multe metode de observare, dintre care cele mai comune sunt metodele câmpurilor luminoase și întunecate. În primul, cel mai simplu, familiar pentru mulți de la școală, pregătirea este iluminată uniform de jos. În acest caz, prin părțile optic transparente ale preparatului, lumina se propagă în lentilă, iar în părțile opace este absorbită și împrăștiată. Pe un fundal alb se obține o imagine întunecată, de unde și denumirea metodei. Cu un condensator cu câmp întunecat, totul este diferit. Fasciculul de lumină care iese din el are formă de con, razele nu cad în lentilă, ci sunt împrăștiate pe un preparat opac, inclusiv în direcția lentilei. Ca rezultat, un obiect ușor este vizibil pe un fundal întunecat. Această metodă de observare este bună pentru studierea obiectelor transparente cu contrast redus. Prin urmare, dacă intenționați să extindeți gama de metode de observare, ar trebui să alegeți modele de microscop care prevăd instalarea de echipamente suplimentare: un condensator de câmp întunecat, o diafragmă de câmp întunecat, dispozitive de contrast de fază, polarizatoare etc.
Sistemele optice nu sunt ideale: trecerea luminii prin ele este asociată cu distorsiuni de imagine - aberații. Prin urmare, ei încearcă să facă lentile și oculare în așa fel încât aceste aberații să fie eliminate cât mai mult posibil. Toate acestea le afectează costul final. Din motive de preț și calitate, este logic să cumpărați lentile acromatice pentru cercetare profesională. Obiectivele puternice (cu o mărire de 100x de exemplu) au o deschidere numerică mai mare de 1 atunci când se utilizează imersie, ulei cu refracție ridicată, soluție de glicerină (pentru regiunea UV) sau doar apă. Prin urmare, dacă, pe lângă lentilele „uscate”, luați și lentile de imersie, ar trebui să aveți grijă de lichidul de imersie în avans. Indicele său de refracție trebuie să corespundă în mod necesar unei anumite lentile.
Uneori ar trebui să acordați atenție designului scenei și mânerelor pentru a o controla. Merită să alegeți tipul de iluminator, care poate fi fie o lampă incandescentă obișnuită, fie un LED, care este mai strălucitor și se încălzește mai puțin. Microscoapele au, de asemenea, caracteristici individuale. Fiecare opțiune suplimentară este un plus la preț, astfel încât alegerea modelului și a configurației este la latitudinea consumatorului.
Astăzi, deseori cumpără microscoape ieftine pentru copii, monocluri cu un set mic de obiective și parametri modesti. Ele pot servi ca un bun punct de plecare nu numai pentru studiul microcosmosului, ci și pentru familiarizarea cu principiile de bază ale microscopului. După aceea, copilul ar trebui să cumpere deja un dispozitiv mai serios.
Cum să urmărești
Puteți cumpăra departe de seturi ieftine de medicamente finite, dar atunci sentimentul de participare personală la studiu nu va fi atât de luminos și se vor plictisi mai devreme sau mai târziu. Prin urmare, trebuie avută grijă atât la obiectele de observare, cât și la mijloacele disponibile pentru pregătirea preparatelor.
Observarea în lumină transmisă presupune că obiectul studiat este suficient de subțire. Chiar și coaja unei fructe de pădure sau a unui fruct este prea groasă, așa că secțiunile sunt examinate la microscopie. Acasă, sunt făcute cu lame de ras obișnuite. Pentru a nu zdrobi coaja, se pune între bucăți de plută sau se umple cu parafină. Cu o anumită îndemânare, puteți obține o grosime a feliei de mai multe straturi de celule și, în mod ideal, ar trebui să lucrați cu un strat monocelular de țesut - mai multe straturi de celule creează o imagine neclară, haotică.
Preparatul de testare se așează pe o lamă de sticlă și, dacă este necesar, se acoperă cu o lamă. Puteți cumpăra ochelari dintr-un magazin de echipamente medicale. Daca preparatul nu adera bine de pahar, se fixeaza prin umezire usoara cu apa, ulei de imersie sau glicerina. Nu orice medicament își deschide imediat structura, uneori are nevoie de „ajutor” prin nuanțarea elementelor formate: nuclee, citoplasmă, organite. Coloranții buni sunt iodul și verdeața. Iodul este un colorant destul de versatil; poate păta o gamă largă de preparate biologice.
Când ieșiți în natură, ar trebui să vă aprovizionați cu borcane pentru colectarea apei din cel mai apropiat rezervor și pungi mici pentru frunze, reziduuri uscate de insecte etc.
La ce să ne uităm
Microscopul a fost achiziționat, instrumentele au fost achiziționate - este timpul să începem. Și ar trebui să începeți cu cel mai accesibil - de exemplu, coaja de ceapă. Subțire în sine, nuanțată cu iod, dezvăluie nuclei celulari clar distinși în structura sa. Această experiență, familiară de la școală, ar trebui făcută mai întâi. Coaja de ceapă trebuie turnată cu iod timp de 10-15 minute, apoi clătită sub jet de apă.
În plus, iodul poate fi folosit pentru a colora cartofii. Tăierea trebuie făcută cât mai subțire. Literal, 5-10 minute din șederea sa în iod vor prezenta straturi de amidon, care vor deveni albastre.
Balcoanele acumulează adesea un număr mare de cadavre de insecte zburătoare. Nu vă grăbiți să scăpați de ele: ele pot servi drept material valoros pentru cercetare. După cum puteți vedea din fotografii, veți descoperi că insectele au fire de păr pe aripi care le protejează de a se uda. Tensiunea de suprafață mare a apei nu permite picăturii să „cadă” prin fire de păr și să atingă aripa.
Dacă ați atins vreodată aripa unui fluture sau a unei molii, atunci probabil ați observat că un fel de „praf” zboară de pe el. Imaginile arată clar că acesta nu este praf, ci solzi de pe aripi. Au forme diferite și sunt destul de ușor de rupt.
În plus, folosind un microscop, puteți studia structura membrelor insectelor și păianjenilor, luați în considerare, de exemplu, filmele chitinoase pe spatele unui gândac. Și, cu o mărire adecvată, asigurați-vă că astfel de filme constau din solzi strâns (eventual topiți).
Un obiect la fel de interesant de observat este coaja fructelor de pădure și fructelor. Cu toate acestea, fie structura sa celulară poate fi indistinguită, fie grosimea sa nu va permite o imagine clară. Într-un fel sau altul, vor trebui făcute multe încercări înainte de a se obține un bun preparat: sortarea diferitelor soiuri de struguri pentru a găsi unul în care substanțele colorante ale coajelor să aibă o formă interesantă, sau efectuarea mai multor tăieturi din coaja de o prună, realizând un strat monocelular. În orice caz, recompensa pentru munca depusă va fi demnă.
Iarba, algele, frunzele sunt și mai accesibile pentru cercetare. Dar, în ciuda ubicuității, alegerea și pregătirea unui medicament bun din ele poate fi dificilă. Cel mai interesant lucru despre verdeață este, poate, cloroplastele. Prin urmare, tăietura trebuie să fie extrem de subțire.
Grosimea acceptabilă se găsește adesea în algele verzi găsite în orice corp de apă deschis. De asemenea, puteți găsi alge plutitoare și locuitori acvatici microscopici - prăjiți de melci, dafnie, amibe, ciclopi și pantofi. Un mic pui de melc, transparent optic, îți permite să-ți vezi bătăile inimii.
auto-explorator
După ce ați studiat preparatele simple și accesibile, veți dori să complicați tehnica de observare și să extindeți clasa de obiecte studiate. Acest lucru va necesita atât literatură specială, cât și instrumente specializate, care sunt diferite pentru fiecare tip de obiect, dar au totuși o oarecare universalitate. De exemplu, metoda colorației Gram, când diferitele tipuri de bacterii încep să difere în culoare, poate fi aplicată și altor celule non-bacteriene. Aproape de aceasta este metoda de colorare a frotiurilor de sânge conform Romanovsky. La vânzare există atât un colorant lichid gata preparat, cât și o pulbere constând din componentele sale - azur și eozină. Pot fi cumpărate în magazine specializate sau comandate online. Dacă nu puteți obține colorantul, puteți cere asistentului de laborator care vă face testul de sânge la clinică un pahar cu un frotiu colorat.
Continuând subiectul cercetării sângelui, ar trebui să menționăm camera Goryaev - un dispozitiv pentru numărarea numărului de celule sanguine și evaluarea dimensiunii acestora. Metodele de examinare a sângelui și a altor fluide cu ajutorul camerei Goryaev sunt descrise în literatura specială.
În lumea modernă, unde o varietate de mijloace tehnice și dispozitive sunt la câțiva pași, fiecare decide singur pe ce să cheltuiască banii. Poate fi un laptop scump sau un televizor cu o diagonală exorbitantă. Sunt și cei care își iau ochii de la ecrane și îl direcționează departe în spațiu, achiziționând un telescop. Microscopia poate deveni un hobby interesant, iar pentru unii chiar o artă, un mijloc de auto-exprimare. Privind în ocularul unui microscop, cineva pătrunde adânc în acea natură, din care noi înșine facem parte.
„Știință și viață” despre microfotografie:
Microscop "Analit" - 1987, nr. 1.
Oshanin S. L. Cu un microscop la iaz. - 1988, nr. 8.
Oshanin S. L. Viața invizibilă pentru lume. - 1989, nr. 6.
Miloslavsky V. Yu. - 1998, nr. 1.
Molina N. . - 2007, nr. 4.
Glosar pentru articol
Deschidere- deschiderea efectivă a sistemului optic, determinată de dimensiunile oglinzilor, lentilelor, diafragmelor și altor părți. Unghiul α dintre razele extreme ale unui fascicul de lumină conic se numește deschidere unghiulară. Apertura numerică A = n sin(α/2), unde n este indicele de refracție al mediului în care se află obiectul de observație. Rezoluția dispozitivului este proporțională cu A, iluminarea imaginii este A 2 . Pentru a crește diafragma, se folosește imersiunea.
Imersiune- un lichid transparent cu indice de refracție n > 1. Preparatul și obiectivul microscopului sunt scufundate în el, mărindu-i deschiderea și prin aceasta mărind rezoluția.
lentilă acromatică plan- O lentilă corectată cu aberația cromatică care produce o imagine plată pe întregul câmp. Acromatii și apocromații obișnuiți (aberațiile corectate pentru două și, respectiv, trei culori) dau un câmp curbiliniu care nu poate fi corectat.
Contrast de fază- o metodă de cercetare microscopică bazată pe modificarea fazei unei unde luminoase care a trecut printr-un preparat transparent. Faza oscilației nu este vizibilă cu ochiul liber, așa că optica specială - un condensator și o lentilă - transformă diferența de fază într-o imagine negativă sau pozitivă.
Monocite- una dintre formele de globule albe.
Cloroplaste- organele verzi ale celulelor vegetale responsabile de fotosinteza.
Eozinofile- celule sanguine care joacă un rol protector în reacțiile alergice.
La fabricarea micropreparatelor temporare, trebuie respectată următoarea secvență de operații:
- 1. Spălați și uscați bine lama și lama de acoperire. Pentru a nu rupe o lamela foarte fragilă, este necesar să o plasați în pliul unui șervețel între degetul mare și arătător de la mâna dreaptă și să o ștergeți ușor cu o mișcare circulară a degetelor.
- 2. Aplicați o picătură de lichid (apă, glicerină, soluție, reactiv sau colorant) pe o lamă de sticlă cu o pipetă.
- 3. Faceți o tăietură a organului studiat cu o lamă. Lama trebuie să fie foarte ascuțită.
- 4. Selectați secțiunea cea mai subțire, transferați-o cu un ac de disecție sau o perie subțire în centrul lamei de sticlă într-o picătură de lichid.
- 5. Închideți secțiunea cu o lamelă, astfel încât aerul să nu intre sub ea. Pentru a face acest lucru, luați lamela cu două degete de margini și aduceți marginea inferioară în unghi față de marginea picăturii de lichid și coborâți-o ușor.
- 6. Dacă există mult lichid și acesta curge de sub lamelă, îndepărtați-l cu hârtie de filtru. Dacă există locuri pline cu aer sub lamelă, apoi adăugați lichid punând o picătură din acesta lângă marginea lamului și hârtie de filtru pe partea opusă.
Mai devreme sau mai târziu, profesorii de biologie și liderii de cercuri se confruntă cu sarcina de a realiza o micropregătire educațională. Ce fel de substanță este capabilă să fixeze un obiect biologic pentru o lungă perioadă de timp și cum să faci această procedură simplă și accesibilă. Balsamurile cunoscute (rășini-fixative) nu au fost niciodată substanțe ușor accesibile, mai ales la distanță de orașele mari. În plus, ei spun că aceste substanțe nu sunt inofensive. Și, în sfârșit, procesul de utilizare a acestora este destul de dificil.
Pentru fabricarea medicamentului, puteți utiliza lipici PVA. Este important ca medicamentul să fie umed, bine umezit, iar adezivul să fie proaspăt și ușor diluat cu apă curată fiartă rece până la concentrația dorită (cleiul este o emulsie și se diluează ușor). După mai multe încercări și erori, concentrația dorită poate fi compilată și determinată fără dificultate.
Apoi, o picătură de apă, fiartă sau distilată, se aplică pe o lamă de sticlă curată. Apa trebuie îndepărtată cu grijă cu o cârpă curată, fără scame sau cu hârtie de filtru, astfel încât paharul să fie ușor umed. Acest lucru, ca și conținutul de umiditate al probei, promovează umezirea uniformă (fără bule). Pe suprafața pregătită, trebuie să aplicați o picătură mică de adeziv PVA pregătit în prealabil, astfel încât să nu apară bule de aer. Uneori nu interferează, dar aspectul medicamentului este stricat. O secțiune sau o probă pregătită în prealabil este transferată cu atenție în această picătură, de exemplu, daphnia ucisă anterior cu apă fierbinte. Apoi, cu o mișcare oblică lină, pune deasupra o lamela, de asemenea curată și ușor umedă. Stratul adeziv dintre geamuri trebuie să fie cât mai subțire posibil.
Dacă ceva a eșuat, iar proba este valoroasă și suficient de mare, aproape întotdeauna, spre deosebire de rășini, este posibil să o spălați cu apă plată și să repetați procedura. Lipiciul în exces este spălat ușor cu un jet subțire de apă; trebuie să vă asigurați că nu curge între geamuri. Geamul de acoperire trebuie ținut. Reziduurile de apă ușor tulburi pot fi îndepărtate cu grijă cu hârtie de filtru sau cu o cârpă subțire, fără scame. metoda de micropreparare biologică
Preparatele gata făcute trebuie așezate într-un loc cald și uscat. Indicatorul gradului de pregătire al medicamentului este transparența acestuia. În funcție de mulți factori, uscarea până la o stare transparentă durează de la una până la patru săptămâni. Se întâmplă ca un strat prea gros de adeziv sau adeziv contaminat cu impurități să nu devină complet transparent - acest lucru înrăutățește oarecum imaginea, dar din cauza adâncimii mici de câmp a microscopului, chiar și astfel de preparate sunt disponibile pentru studiu.
Nu există nicio garanție că această metodă poate fi utilizată pentru a face orice preparate, deoarece unele dintre ele necesită colorare, iar coloranții pot interacționa cu adezivul.
T.N. Lashkina, profesor de biologie și ecologie la școala secundară nr. 23, din orașul Syzran, oferă următoarea metodă de preparare a micropreparatelor. Puteți lua gelatină obișnuită, turnați-o cu apă pentru a se umfla. Apoi, într-o lingură, se adună puțină gelatină umflată (fără apă) și se încălzește la foc. Când gelatina se dispersează (nu este necesar să fiarbă), aruncați-o pe o lamă de sticlă. Puneți proba în această picătură și închideți-o cu o lametă, apăsați-o bine cu degetul pentru a distribui uniform gelatina. Micropreparatul este gata.
Celofanul poate fi folosit în locul unei lame de acoperire dacă nu sunt disponibile lamele. În plus, celofanul are un avantaj: micropreparatul nu poate fi zdrobit, deoarece. Celofanul este elastic și nu crapă ca o lamela.
Trebuie sa lucrezi rapid cu gelatina, altfel ingheata. Dar dacă se întâmplă acest lucru, atunci este suficient să țineți paharul deasupra focului - iar gelatina va deveni din nou lichidă. Gelatina este inofensivă, accesibilă și foarte economică.
Primul pas pe drumul spre studiul microcosmosului este, desigur, alegerea și cumpărarea microscopului în sine. Și dacă ați avut norocul să faceți față acestei sarcini dificile, ați ales ce microscop să cumpărați și, poate, l-ați cumpărat deja, atunci putem spune că sunteți deja aproape la jumătatea obiectivului dvs. Și acum ați scos deja microscopul din cutie, l-ați asamblat, l-ați instalat, l-ați configurat ... și ce să faceți în continuare? Și atunci trebuie să faci multă muncă, pentru că pentru a te apropia de lumea științei, se dovedește că nu este suficient doar , dar trebuie totuși să învățați cum să pregătiți preparatele pentru examinare la microscop.
Mulți producători de instrumente optice produc microscoape pentru copii cu preparate gata făcute în kit. Tot astăzi puteți cumpăra diverse seturi de preparate finite, așa-numitele lame, 10, 25, 50 și chiar 100 de bucăți de piese de sticlă de diferite subiecte. Și, deși astfel de truse sunt o plăcere relativ costisitoare, cu toate acestea, ele pot fi foarte interesante și utile atât pentru un copil, cât și pentru un student al unui institut medical, deoarece multe dintre preparate sunt pur și simplu nerealiste de pregătit acasă.
Astfel, printre preparatele gata preparate puteți găsi mostre de bacterii, secțiuni de plămâni, ficat, piele umană și animală, și alte mostre interesante care nu sunt atât de ușor, dacă nu imposibil de întâlnit în viața de zi cu zi.
Dar, pe lângă astfel de preparate gata făcute, poți explora și diverse obiecte disponibile acasă. Pentru a pregăti obiectele pentru examinare la microscop, veți avea nevoie de o lamă de sticlă și o lamă de acoperire, care pot fi achiziționate de la magazinele de produse optice.
Una dintre cele mai populare mostre pe care le puteți găti singur este un film de ceapă. Pentru a face acest lucru, mai întâi trebuie să curățați ceapa de coajă uscată și apoi cu grijă (puteți folosi o pensetă) pentru a îndepărta o peliculă subțire. Pune câteva picături de apă pe o lamă de sticlă, apoi așează cu grijă o peliculă de ceapă pe ea. Dacă filmul este puțin mototolit, luați un ac și îndreptați proba pe sticlă cu el. Apoi, folosind o pipetă, scăpați o picătură de soluție de iod și acoperiți proba cu o lamă.
În mod similar, puteți pregăti o mulțime de mostre diferite din plante, legume etc. Trebuie reținut că atunci când examinați un obiect sub un microscop biologic, este necesar să luați obiecte plate transparente. Microscoapele biologice sunt concepute pentru examinare în lumină transmisă și au o iluminare mai scăzută, astfel încât secțiunile de plante ar trebui să fie cât mai subțiri și precise posibil. În acest scop, a fost inventat un instrument precum microtomul. Microtom este un instrument care poate fi folosit pentru a pregăti cu ușurință secțiuni foarte subțiri de țesuturi biologice. Atât de multe microscoape pentru copii vin cu microtome, desigur, nu profesionale, dar mai sigure pentru bebelușul tău. Dar chiar dacă nu aveți un microtom printre accesoriile de disecție, puteți folosi o lamă obișnuită sau un cuțit utilitar. Nu uitați de precauțiile și siguranța copilului dumneavoastră, așa că este mai bine să nu-l lăsați să ia o lamă, un cuțit sau un microtom fără supravegherea dumneavoastră.
Atunci când pregătiți diverse probe, este posibil să aveți nevoie și de coloranți, pentru care puteți utiliza o soluție de iod, o soluție apoasă de albastru de metilen (cu alte cuvinte, „albastru”), eozină etc.
De asemenea, puteți examina cristale de zahăr, sare, rădăcină de păr, mucegai la microscop (de exemplu, creșteți mucegaiul de ceai într-un ceainic).
Dacă nu vă place foarte mult proba pregătită, puteți încerca cu mare atenție să separați lama de acoperire și lama (astfel de preparate care nu se fixează mult timp se numesc temporare), clătiți, ștergeți, uscați și folosiți-le mai târziu pentru a pregăti alte preparate. Fiți deosebit de atenți, deoarece lamelele și toboganele sunt foarte subțiri și casante, se crăpă ușor și nu lăsați copiii să se joace cu toboganele. Dacă doriți să salvați acest preparat, atunci înainte de a-l acoperi cu o lametă, picurați puțin fixativ (de exemplu rășină de brad sau adeziv transparent) în jurul marginilor specimenului (un astfel de preparat se va numi permanent). Apoi apăsați-l și lăsați-l să se usuce (aproximativ o zi).
Acum, după ce ai finalizat cu succes acest pas, poți începe chiar procesul de observare și cercetare! Vă dorim succes!
Pata Gram.
Etapa 1- pregătirea unui frotiu.
Lama de sticlă se arde în flacăra unui arzător cu gaz. Cu un creion de ceară, marcați limitele viitorului frotiu sub forma unui cerc cu diametrul de 1-2 cm și puneți paharul pe masă. Cu o buclă calcinată, o picătură mică de soluție sterilă izotonică de clorură de sodiu (ICN) este aplicată în mijlocul cercului. Apoi, la această picătură se adaugă o cantitate mică de cultură bacteriană, emulsionată cu grijă și distribuită într-un strat subțire în cerc. Frotiurile din culturile bulionului sunt preparate fără aplicarea prealabilă a ICN.
2 etapă- uscare.
Paharul este lăsat în aer până când umiditatea dispare.
3 etapă- fixare.
Fixarea este efectuată pentru a ucide microbii, a-i atașa de sticlă și a crește susceptibilitatea lor la coloranți. Pentru fixare, se aplică o lamă de sticlă (în sus) de trei ori pe flacăra arzătorului timp de 2-3 secunde cu un interval de 4-6 secunde. Frotiurile din puroi, sânge, spută, lichid edematos sunt fixate prin scufundare în fluide de fixare (acetonă, amestec Nikiforov). Această fixare evită deformările grosolane ale obiectului de studiu.
Etapa 4 - colorare.
Există metode simple și complexe (diferențiatoare) de colorare. Metodele simple fac posibilă aprecierea dimensiunii, formei, localizării și poziției relative a celulelor. Metodele complexe fac posibilă stabilirea structurii microbilor și, adesea, a relației lor inegale cu coloranții. Un exemplu de metode simple este colorarea cu fuchsin (1-2 minute), albastru de metilen sau violet cristal (3-5 minute) și cele complexe - colorarea conform Gram, Romanovsky-Giemsa, Ziehl-Nielsen.
Metoda de diferențiere a lui Gram
După colorarea cu această metodă, unele bacterii sunt colorate într-o culoare violet închis (gram-pozitiv, Gr +). altele - în roșu visiniu (gram-negativ, Gr-). Esența acestei metode de colorare este că bacteriile Gr+ fixează ferm complexul de violet de gențiană și iod fără a se decolora cu etanol. Gr-bacteriile după albire sunt finisate colorate cu fuchsin.
Pași de colorare Gram